Différence entre RT-PCR et QPCR

Réaction en chaîne en polymérase de transcription inverse (RT-PCR)

RT-PCR VS. Qpcr

Les progrès de la biotechnologie ont entraîné la découverte de plusieurs façons de faire face aux demandes de transplantation d'organes au fil des ans. Auparavant, une personne qui ferait volontairement un don de n'importe quel organe immédiatement après la mort à un patient dans le besoin ne pouvait que relancer l'opération pour les transplantations. Les études et les recherches continues des biologistes conduisent à la découverte de cellules souches.

Les cellules souches se réfèrent à celles qui sont tirées de l'ADN d'un embryon, qui serviront de source pour la régénération des cellules qui seraient essentiellement un clone de l'organe où l'ADN a été récupéré. Alors que les militants des droits de l'homme font pression pour l'arrêt de ces procédures, les opérations réussies ont en effet prouvé l'efficacité des développements des cellules souches dans les transplantations d'organes.

Avant que l'on puisse apprécier et bien comprendre les cellules souches, cependant, il est nécessaire de se familiariser avec les différentes terminologies associées à cette découverte scientifique. La culture des cellules souches traite de l'ADN et de son codage. Ainsi, il est essentiel pour les étudiants ou les personnes intéressées par le domaine de différencier RT-PCR et QPCR.

La réaction en chaîne en chaîne de la transcription inverse (RT-PCR) est l'une des nombreuses variantes de la réaction en chaîne par polymérase, ou PCR. Cette technique de laboratoire est largement utilisée en biologie moléculaire afin que les scientifiques produisent plusieurs copies d'une séquence d'ADN particulière à travers un processus inventé comme «Amplification.«La différence entre RT-PCR et PCR traditionnel est que l'ARN est d'abord transcrit en inverse dans son complément ADN, qui utilise la transcriptase inverse. Le nouvel ADN complémentaire contenant la transcription inversée sera ensuite amplifié en utilisant la PCR traditionnelle ou la PCR en temps réel.

La plupart des étudiants qui étudient ce processus font souvent l'erreur d'échanger la PCR de transcription inverse et la PCR en temps réel car les deux sont abrégés de manière similaire. Pour éviter la confusion, les biologistes qualifient la PCR en temps réel de PCR quantitative en temps réel ou qPCR.

QPCR diffère considérablement du RT-PCR, car qPCR est responsable de la mesure de l'amplification au fur et à mesure de sa présence. On peut dire que RT-PCR démarre le processus d'amplification, tandis que QPCR le mesure au fur et à mesure que la procédure a lieu.

PCR quantitative en temps réel

Le qPCR a en fait révolutionné la méthode d'approche unidirectionnelle traditionnelle lorsqu'il s'agit de quantifier l'ADN et l'ARN, car l'application de la méthode QPCR permet aux biologistes de déterminer la concentration initiale de l'acide de noyaux avant même que les résultats de la réaction aient été observés et griffonné.

L'application de qPCR, qui est maintenant considérée comme la technique d'analyse la plus puissante et la plus sensible pour les études génétiques, s'est élargie de manière significative. Il est actuellement impliqué dans l'analyse quantitative de l'expression des gènes, le génotypage, la détection des pathogènes et l'analyse du SNP, ainsi que des mesures d'interférence de l'ARN.

Le qPCR est souvent combiné avec le processus de transcription inverse pour quantifier l'ARN messager et le microARN présent dans les cellules des tissus observés et expérimentés avec. Cela donne alors une autre différence visible entre les deux: RT-PCR peut être utilisé pour le processus d'amplification, mais il doit être fusionné avec qPCR à des fins de quantification.

QPCR est également connu pour être plus quantitatif car les données peuvent être collectées à mesure que la phase de croissance exponentielle (log) de la PCR progresse. Les biologistes notent que la quantité de sous-produit de la PCR est directement proportionnelle à la quantité d'acide nucléique de modèle qui sera mesurée via QPCR.

D'un autre côté, RT-PCR est loin d'avoir une nature quantitative car le respect de l'intensité de la bande amplifiée sur un gel suivant la norme définie d'une concentration peut conduire à une inférence «semi-quantitative».

Résumé:

1.QPCR et RT-PCR sont les deux termes utilisés en biotechnologie et utilisés pour la production de plusieurs copies d'ADN.
2.RT-PCR est utilisé pour amplifier la transcription inversée du code ADN; QPCR mesure l'amplification.
3.RT-PCR est pour l'amplification, tandis que QPCR est pour la quantification.
4.QPCR est de nature quantitative, tandis que RT-PCR n'est pas.